微生物拍掃描電鏡如何干燥 二維碼
發(fā)表時間:2023-08-04 16:58作者:鑠思百檢測 微生物拍掃描電鏡如何干燥?今天鑠思百檢測小編帶大家了解一下。同時給大家介紹一下 掃描電子顯微鏡SEM之微生物樣品制備。掃描電子顯微鏡(SEM) 掃描電子顯微鏡(SEM)對測試樣品的基本要求是干燥且導(dǎo)電性好。然而,微生物樣品含水量大,質(zhì)地軟、干燥脫水易變形、機械強度低,不能耐受電子束轟擊,生物組織是由原子序數(shù)較低的元素組成,二次電子發(fā)生率低。因此,對微生物樣品進行SEM測試之前需要對其進行相應(yīng)的前處理。
微生物拍掃描電鏡如何干燥?
通常使用SEM對陽極材料及陽極表面微生物形貌進行觀察,含有微生物的樣品預(yù)處理過程如下:
①收集菌體:取液體培養(yǎng)基中的菌液在8000rpm中離心3-5min,棄去上清液(要求菌體有黃豆大小); ②固定:倒入2.5%戊二醛(需要用PBS配制)1 mL,過夜靜置; ③脫水:用PBS清洗3次,每次靜置30 min。然后用乙醇(乙醇稀釋)進行梯度脫水(濃度分別為30%、50%、70%、85%、90%各1次,100%乙醇2次,每次脫水15 min),進入下一梯度時8000 rpm離心棄去上清液這一步結(jié)束后,加入適量100%的叔丁醇(>995%,麥克林)置換乙醇,該步驟重復(fù)2-3次,每一步完成后經(jīng)過8000 rpm離心5 min,在4℃下靜置30分鐘; ④加入新鮮的叔丁醇,以剛沒過菌體樣品為宜,在先在-80℃冰箱中冷凍12 h,再冷凍干燥12 h,備用; |