malditof質(zhì)譜圖怎么看 二維碼
發(fā)表時間:2024-04-23 10:54作者:鑠思百檢測 基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜(MALDI-TOF MS)的離子源通過激光轟擊待測樣品與基質(zhì)形成的共結(jié)晶薄膜,使基質(zhì)從中吸收能量并傳遞給生物分子,二者間發(fā)生質(zhì)子(即電荷)轉(zhuǎn)移而使生物分子電離。電離的生物分子在電場作用下加速通過飛行管道,根據(jù)到達(dá)檢測器的時間及離子的數(shù)量得到質(zhì)荷比值(m/z)及信號值而形成相應(yīng)的峰圖。進(jìn)行MALDI-TOF-MS分析過程中可優(yōu)化脈沖激光、模式、加速電壓、激光強(qiáng)度等參數(shù),最終獲得理想的質(zhì)譜圖。 MALDI-TOF質(zhì)譜數(shù)據(jù)分析過程中,需要對得到的譜圖進(jìn)行肽質(zhì)量指紋譜(PMF)數(shù)據(jù)庫搜索,將數(shù)據(jù)庫中的蛋白序列理論酶切成肽段,計(jì)算其理論圖譜,與實(shí)驗(yàn)圖譜進(jìn)行比對得到結(jié)果(扣除基質(zhì)本底、酶自切和角蛋白污染峰)。 此外,需要根據(jù)樣品的具體結(jié)果進(jìn)行相應(yīng)的分析。若一個點(diǎn)鑒定得到多個蛋白的選擇,一般選擇得分最高的蛋白,如果得分最高的蛋白功能不明確,同時得分稍低一些的蛋白與最高分蛋白差別不大且功能相對明確,也可以選擇得分稍低一些的蛋白。串聯(lián)質(zhì)譜通常以肽合成結(jié)果為主,碎片離子可信度高,再結(jié)合蛋白合成分析,看碎片離子峰匹配狀況,匹配越好越可信。鑒定到的蛋白還可以結(jié)合其它信息(如等電點(diǎn)pI,分子量MW等)進(jìn)行驗(yàn)證。有時鑒定到的結(jié)果差別較大,很多翻譯后修飾、蛋白提取及電泳過程中的人為修飾以及蛋白降解、可變剪切等會造成此現(xiàn)象,與質(zhì)譜鑒定結(jié)果的好壞無關(guān)。 鑠思百檢測提供MALDI-TOF-MS質(zhì)譜鑒定分析服務(wù),適用于對分子量低于25kDa的蛋白質(zhì)進(jìn)行鑒定。您只需要將您的需求和樣品寄給我們,我們會負(fù)責(zé)項(xiàng)目后續(xù)所有事宜,包括樣品前處理、MALDI-TOF-MS質(zhì)譜分析、質(zhì)譜原始數(shù)據(jù)分析和生物信息學(xué)分析。 MALDI-TOF質(zhì)譜圖怎么看?
確定質(zhì)譜圖中的離子種類:質(zhì)譜圖中通常會出現(xiàn)多種離子,包括分子離子、碎片離子等。首先需要確定質(zhì)譜圖中的離子種類,進(jìn)而分析其含義。 分析質(zhì)譜圖中的峰:質(zhì)譜圖中的峰代表離子的相對豐度,可以通過對峰的位置、大小、形狀等進(jìn)行分析,來確定化合物的分子結(jié)構(gòu)和組成。 確定峰的分子量:質(zhì)譜圖中的每個峰都代表了一個離子,通過計(jì)算峰的分子量,可以確定化合物的分子量和分子式。 分析碎片離子:質(zhì)譜圖中的碎片離子可以提供有關(guān)化合物結(jié)構(gòu)的重要信息,通過分析碎片離子的分子量和相對豐度,可以確定化合物的分子結(jié)構(gòu)。
質(zhì)譜圖中的基線、峰的寬度、信噪比等。同時,需要結(jié)合化學(xué)知識和實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,才能得出準(zhǔn)確的結(jié)論。 知識擴(kuò)展: 質(zhì)譜圖是質(zhì)譜分析的結(jié)果之一,質(zhì)譜分析是一種廣泛應(yīng)用于化學(xué)、生物、環(huán)境等領(lǐng)域的分析技術(shù)。除了質(zhì)譜圖,質(zhì)譜分析還包括質(zhì)譜質(zhì)量分析、質(zhì)譜碎片分析、質(zhì)譜譜圖解析等。質(zhì)譜分析在新藥研發(fā)、環(huán)境監(jiān)測、食品安全等領(lǐng)域具有重要的應(yīng)用價值。 |